Βρίσκεται κοντά στη βόρεια πλευρά του βράχου της Ακρόπολης, στη δυτική πλευρά των Αναφιώτικων (δίπλα στον αριθ. 29).

Είναι κι αυτή η εκκλησία μικρή μονόκλιτη βασιλική, με τυφλά τόξα στους μακρούς τοίχους και άλλα εγκάρσια ενισχυτικά. Μία νεότερη επιγραφή, στην ανατολική θύρα του περιβόλου, έχει χαραγμένη τη χρονολογία 1774. Μετά από τις καταστροφές που έπαθε από τα πολεμικά γεγονότα της Επανάστασης, αναστηλώθηκε και αυτή, το 1843, από τους ευσεβείς Αναφιώτες, που επηρεασμένοι όμως από το παράδειγμα του νέου Μητροπολιτικού Ναου της πρωτεύουσας, της έδωσαν μία νεοκλασική εξωτερική διακόσμηση με κίτρινες και κόκκινες λουρίδες και της πρόσθεσαν μονόλοβο καμπαναριό. Στην εκκλησία, εκτός από τα άλλα αφιερώματα, τοποθέτησαν και ένα αντίγραφο της θαυματουργής εικόνας της Παναγίας της Καλαμιώτισσας του νησιού τους.

Ανήκει στον Σύλλογο των απανταχού Αναφαίων και εορτάζει στις 3 Φεβρουαρίου.